摘要：目的：探索乙肝病毒血清学标志物阳性产妇血清、乳汁及新生儿脐带血中 HBV-DNA 含量。方法：选择120例携 带乙肝病毒的待产妇作为研究对象，根据入院即刻检测到的 HBV-DNA定量结果分为 HBsAg 阳性组（85 例）和 HBsAg 阴性组（35 例），分析产妇血清、乳汁及其新生儿脐带血中HBV-DNA含量。结果：HBsAg阳性组的血清、乳汁及新生儿脐带血中 HBV-DNA 阳性率高于HBsAg阴性组（P＜0.05）。血清HBV-DNA 含量≥108 copies/mL 的产妇的乳汁、新生儿脐带血 HBV-DNA 阳性率及新生儿 HBV-DNA 的 Log 病毒载量高于血清 HBV-DNA 含量＜108、＜105、＜500 copies/mL 的产妇（P＜0.05）。结论：HBsAg 阳性产妇存在母婴传播几率，且产妇产后血清HBV-DNA含量较高，因此对于HBsAg阳性产妇需加强监测，在科学指导下完成母乳喂养。

关键词：乙肝病毒；血清学标志物；产妇；乳汁；新生儿脐带血；HBV-DNA

中图分类号：R440 文献标志码：A 文章编号：2096-1413(2020)32-0127-03

乙型肝炎病毒属嗜肝DNA病毒科，目前在我国极为常见，已成为世界公共卫生问题[1]。近年来数据统计显示，孕产妇乙肝病毒表面抗原（HBsAg）阳性（乙肝病毒血清学标志物阳性）率直线上升，而母婴传播是引发慢性乙型肝 炎病毒（HBV）感染的重要因素，20%新生儿通过产后接触 感染乙型肝炎病毒，50%是通过分娩传播、宫内感染等母 婴传播感染，为了控制母婴传播，避免产生严重后果，还需 深入探索 HBsAg 阳性与产妇血清、乳汁及其新生儿脐带 血中 HBV-DNA 含量之间的关系[2]。由于母乳喂养是产后 新生儿感染乙肝病毒最常见的病因，因此可检测母乳中和 产妇血清中乙肝病毒含量，从而预测新生儿感染乙肝病毒 的几率，为了进一步了解感染途径，还需注重新生儿脐带 血中HBV-DNA 含量的检测，以便日后更好地阻断传播途径[3]。基于此，本研究探索乙肝病毒血清学标志物阳性产妇血清、乳汁及新生儿脐带血中HBV-DNA含量，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2019年1月10日至2020年1月15日接收的120例携带乙肝病毒的待产妇作为研究对象，根据入院即刻检测到的HBV-DNA 定量结果[4]分为 HBsAg 阳性组（85 例）和 HBsAg 阴性组（35例）。HBsAg阳性组产妇平均年龄（26.89±5.86）岁；平均孕周（39.86±1.58）周；平均体 重（70.86 ±5.95）kg；平均孕次（2.86 ±1.02）次；平均产次 （1.47±0.29）次。HBsAg 阴性组产妇平均年龄（26.53±5.74） 岁；平均孕周（39.55±1.21）周；平均体重（70.75±5.41）kg；平均孕次（2.55±1.01）次；平均产次（1.56±0.31）次。两组一般资料无显著差异（P＞0.05）。本研究经伦理委员会批准，产 妇均签署书面知情同意书。 纳入标准：符合产科学组、中华医学会妇产科学分会 共同拟定的《乙型肝炎病毒母婴传播预防临床指南（第1版）》[5]中乙型肝炎病毒的临床诊断标准；单胎妊娠；年龄≥ 20 岁。排除标准：资料不齐全，出现抵抗情绪的患者；合并肝癌、肝硬化或其他感染性疾病的患者；沟通障碍、交流障碍的患者。

1.2 方法

调查方法：首先对所有入选的待产妇建档，方便后期 随访工作的开展，详细记录待产妇孕检情况、HBV感染史、HBV-DNA定量检测、乙肝两对半检测结果，并收集产妇乳汁、血清及新生儿脐带血，进行HBV-DNA定量检测，鉴别 HBV 感染情况。乙肝两对半检测：分别抽取两组产妇的空腹静脉血 3 mL，进行肝素抗凝，并分离血清，保持 3 000 r/min 速度，离心10min，在检测乙肝两对半时，分为五项：乙肝核心抗体（HBcAb）、乙肝e抗体（HBeAb）、乙肝e抗原（HBeAg）、HBsAg、HBV。使用深圳爱康有限公司提供的 URANUS AE120 型号全自动酶免分析仪检测乙型肝炎病毒血清 指标，试剂盒由北京万泰生物有限公司提供，具体方法按照说明书进行，注意单日质控保证结果的有效性，比色 波长 450 mm。血清标本采集及检测：抽取空腹3mL 非抗凝血液，离心分离血清，3000 r/min，采用荧光定量PCR 法检测 HBV-DNA 含量，质控品购自卫生部临床检验中心；试剂盒由中山大学达安基因生物有限公司提供；全自动基因扩增仪为AB17300型。循环条件：40 ℃ 5 s、57 ℃ 45 s、93 ℃ 5 s、93 ℃ 2 min。HBV-DNA 含量以＞1×102copies/mL为阳性[6]。乳汁标本采集及检测：在产妇分娩后3d内收集乳汁，用一次性无菌容器装取 2 mL乳汁，注意清洁、消毒局部乳房，在收集标本后，保持10000×g离心5min，在1mL无菌生理盐水中加入留取的沉淀物并混匀，再次10000×g离心5min，介入40μLDNA提取液，在充分混匀后，静置10min，再次进行同等方法的离心5min，留取2μL上清液进行PCR反应，并立即进行HBV-DNA含量检测。新生儿脐带血标本采集及检测：剖宫产或阴道分娩后，断脐，在脐带部进行碘伏（2%）消毒，并抽取脐静脉血3mL，保存在试管后送检，分离血清，静置1min，以6000×g 离心10 min状态进行HBV-DNA含量检测。

1.3 观察指标

比较两组产妇血清、乳汁及新生儿脐带血中HBVDNA阳性率；比较不同血清 HBV-DNA 含量产妇的乳汁、新生儿脐带血 HBV-DNA阳性率及新生儿HBV-DNA的Log病毒载量。

1.4 统计学方法

采用SPSS22.0统计学软件处理数据，计数资料用n/% 表示，用χ2检验，计量资料用x軃 ± s 表示，用t检验，以 P<0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组产妇血清、乳汁及新生儿脐带血中 HBV-DNA 阳 性率比较 HBsAg 阳性组的血清、乳汁及新生儿脐带血中 HBVDNA 阳性率高HBsAg 阴性组，差异具有统计学意义 （P＜0.05，表1）。

2.2 不同血清 HBV-DNA 含量产妇的乳汁、新生儿脐带血 HBV-DNA 阳性率及新生儿 HBV-DNA 的 Log 病毒载量 比较血清HBV-DNA 含量≥108 copies/mL 的产妇的乳汁、 新生儿脐带血 HBV-DNA 阳性率及新生儿 HBV-DNA 的 Log 病毒载量高于血清 HBV-DNA 含量＜108、＜105、 ＜500 copies/mL 的产妇的乳汁、新生儿脐带血 HBV-DNA 阳性率及新生儿 HBV-DNA 的Log病毒载量，差异具有统计学意义（P＜0.05，表2）。

3 讨论

乙型肝炎病毒是我国多发的一项传染性疾病，属于DNA病毒，经数据统计，目前全球感染乙型肝炎病毒患者多达2.4亿，主要传播途径为密切接触、母婴、体液传播，一旦患病，可严重危害患者身心健康。对于待产妇而言，可通 过三条途径传播，一是母乳喂养或密切接触时，可通过乳汁传播；二是分娩过程中，胎儿经过产道娩出，可因为吞食阴道分泌物、血液、羊水引起感染；三是妊娠时经过胎盘，发生宫内感染[7]。目前控制下一代乙型肝炎传染的主要措施为阻断母婴传播，有研究表明，产妇乳汁、血液以及新生儿脐带 血是了解传染性 HBV-DNA 含量的最特异、最直接指标[8]。 为了进一步证实乙肝病毒血清学标志物阳性与母婴体内 HBV-DNA含量的关系，笔者将产妇乳汁、血液以及新生儿 脐带血作为研究样本，分析其相关性。

HBV在胎盘内可通过细胞传递或经血液传递造成宫内传播，主要作用机制为：当胎盘受到HBV感染后，可因HBsAg介导的免疫复合物，促使部分绒毛纤维素样坏死，增加通透性，进而导致病毒穿透胎盘，直接感染胎儿[9]。此外，当产妇进入孕中晚期后，可因为绒毛毛细血管膜通透性增高，滋养层逐渐变薄，促使胎盘屏障更容易被HBV突破，增加母婴传播率，且越接近妊娠期，感染率越高[10]。通过反复多次注射乙肝免疫球蛋白虽无法控制HBsAg和HBeAg的阳性率，但可减少宫内感染率，进一步提高阻断 效果，减少产妇HBV-DNA载量。本研究结果显示，120例产妇中，85例（70.83%）HBsAg 阳性，主要是因为孕产妇在妊娠期间代谢旺盛和抵抗力下降，为病毒复制、繁殖提供有力条件。HBV肝炎病毒表面抗原是乙型肝炎病毒的外膜蛋白，人感染HBV后4~7d，血清中出现 HBsAg，且常伴 有 HBV-DNA 存在，并存在于乳汁等体液中[11]。因而乳汁是否可成为传染源也广泛受到学者重视。本研究结果显示，HBsAg 阳性组的产妇乳汁及产妇血清 HBV-DNA 阳性率高于HBsAg阴性组（P＜0.05），主要是因为 HBV 在复制 周期中可因为病毒分布和体液分布的差异，导致感染率大不相同，随着时间的推移和乳汁需要量的增加，含有病毒成分血液可渗透到乳汁中，从而导致乳汁HBV-DNA阳性率上升，但在 HBV-DNA 阴性产妇中，结果证实乳汁是相 对安全性，由此说明，即便携带HBV的产妇还是可以安全 进行母乳喂养的，但在哺乳前仍需检测乳汁HBV-DNA含量，以提高母乳喂养安全性[12]。为了防止漏检，还需在注重两者标本检测基础上，配合脐带血检测。本研究中，HBsAg阳性组的新生儿脐带血HBV-DNA阳性率高于HBsAg阴性组（P＜0.05），主要是因为脐带血含有母体血液成分，存在携带HBV的可能因素，本次结果也证实了通过检测脐带血HBV-DNA能够预测新生儿感染几率，从而尽早接种乙肝疫苗，阻断传播[13]。

HBV-DNA是HBV病毒核心的基因片段，若高病毒载量感染者处于活动期，代表当前存在较高的感染几率，而病毒载量检测也代表病毒的复制状态，本研究中，血清 HBV-DNA 含量≥108 copies/mL的产妇的乳汁、新生儿脐带血HBV-DNA阳性率及新生儿HBV-DNA的 Log病毒载量高于血清HBV-DNA含量＜108、＜105、＜500copies/mL的产妇（P＜0.05），说明产妇血清 HBV-DNA 含量越高，乳汁、脐带血 HBV-DNA阳性率越高，相应的新生儿HBVDNA的Log病毒载量也较高，为此还需注重HBV-DNA含量的检测和Log病毒载量的检测，从而准确评判当前传播、感染几率。

综上所述，待产妇产前存在乙型肝炎病毒感染时，产后HBV感染发生率较高，且容易产生母婴传播。而产妇HBV染状态可影响母婴传播几率，为了阻断母婴传播，还需尽早实施主被动联合免疫治疗。

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